CRISPR/Cas9基因编辑技术来源于对细菌和古细菌的CRISPR-Cas适应性免疫系统的研究[1]。1993年首次发现CRISPR，经过超过九个国家20多年的努力，最终可用于基因编辑[2]。S. pyogenes的CRISPR-Cas9系统由cas基因操纵子执行，其抗病毒防御的自然途径包括Cas9与antirepeat-repeat RNA (tracrRNA:crRNA)结合、ribonuclease III处理、进一步修剪、 R-loop形成、以及Cas9的HNH和RuvC-like结构域切开目标DNA[3]。crRNA与互补的DNA结合，然后mature tracrRNA与crRNA结合，进而Cas9通过recognition (REC) lobe识别tracrRNA:crRNA:DNA、通过PAM-interacting (PI) domain识别靶DNA上的protospacer-adjacent motif (PAM) [3-4]。

       Transcription activator-like effector nucleases (TALEN)是一种限制性酶，由DNA结合域和DNA切割结构域组成，可以特异切割DNA。DNA结合域是来源于黄杆菌属的transcription activator–like effector (TALE)蛋白，其通过33-35氨基酸的重复结构域（repeat domain）识别一个碱基，识别碱基的特异性是由被称为“repeat variable di-residue” (RVD)的两个连续的氨基酸决定的。因此，特定的连续的重复结构可以识别特定的核酸序列。DNA切割结构域是FokI。将TALEN引入细胞中，可进行基因组编辑。利用一对TALEN，可以对双链DNA进行切割[1-3]。TALEN在细胞基因组中造成双链断裂之后，可进行homology-directed repair (HDR) 或者error-prone nonhomologous end joining (NHEJ)的修复，利用这种修复机制，可对特定的基因进行敲出、敲入、翻转和定点突变 [3]。利用TALEN进行基因敲出的效率可以达到25% [1]。

      CRISPR/Cas9基因编辑技术来源于对细菌和古细菌的CRISPR-Cas适应性免疫系统的研究[1]。1993年首次发现CRISPR，经过超过九个国家20多年的努力，最终可用于基因编辑[2]。S. pyogenes的CRISPR-Cas9系统由cas基因操纵子执行，其抗病毒防御的自然途径包括Cas9与antirepeat-repeat RNA (tracrRNA:crRNA)结合、ribonuclease III处理、进一步修剪、 R-loop形成、以及Cas9的HNH和RuvC-like结构域切开目标DNA[3]。crRNA与互补的DNA结合，然后mature tracrRNA与crRNA结合，进而Cas9通过recognition (REC) lobe识别tracrRNA:crRNA:DNA、通过PAM-interacting (PI) domain识别靶DNA上的protospacer-adjacent motif (PAM) [3-4]。

       Transcription activator-like effector nucleases (TALEN)是一种限制性酶，由DNA结合域和DNA切割结构域组成，可以特异切割DNA。DNA结合域是来源于黄杆菌属的transcription activator–like effector (TALE)蛋白，其通过33-35氨基酸的重复结构域（repeat domain）识别一个碱基，识别碱基的特异性是由被称为“repeat variable di-residue” (RVD)的两个连续的氨基酸决定的。因此，特定的连续的重复结构可以识别特定的核酸序列。DNA切割结构域是FokI。将TALEN引入细胞中，可进行基因组编辑。利用一对TALEN，可以对双链DNA进行切割[1-3]。TALEN在细胞基因组中造成双链断裂之后，可进行homology-directed repair (HDR) 或者error-prone nonhomologous end joining (NHEJ)的修复，利用这种修复机制，可对特定的基因进行敲出、敲入、翻转和定点突变 [3]。利用TALEN进行基因敲出的效率可以达到25% [1]。

      安泰吉的CHO-K1-GS稳定细胞系，可以高效地筛选出高表达的稳定性细胞株。此外，通过安泰吉的糖基改造细胞株以及人源化改造细胞株，能够为抗体进行不同改造的抗体。通过从细胞水平、蛋白表达水平和基因水平进行多水平的分析和考量，帮助客户挑选出最优的单克隆。通过与自主开发的培养基相结合，对于抗体类项目，产量一般可以达到1g/L以上。安泰吉在蛋白/抗体药物分子的设计和开发上积累了丰富的研发经验，提供高效、快速、稳定细胞系构建服务，可明显提高细胞的抗体表达量和产率，显著缩短细胞稳定株的开发时间，满足客户的需求。

       糖基结构改造CHO细胞株系是不仅赋予所生产的单抗药物更高的ADCC活力的工业生产用细胞母株，而且能显著降低生产成本，提升企业效益。安泰吉已成功开发出了自主知识产权的糖基结构改造CHO细胞株系和糖基结构改造 GS^-/- CHO细胞株系，并且用这些细胞株系成功地表达和生产了多款生物仿创药物和创新型高效抗体药物。

       在确定了生产用的‘抗体高产的单克隆CHO细胞稳定株’以后，需要尽快使其适用生产规模下的培养条件。

       抗体生产的关键技术指标主要包括：CHO细胞稳定株的抗体表达能力应该 >20p/c/d/（可通过CHO细胞稳定株的构建来实现）；大规模培养工艺的抗体生产水平应该 >2g/L；抗体的纯化收率应该大于70%（可通过抗体的大规模纯化工艺和质量控制来实现）。要实现大规模生产抗体 >2g/L的指标，就需要探索和优化CHO细胞稳定株的小试工艺条件，通过0.1-2L, 5-50L, 100-200L 和200-2000L的生物反应器（bioreactors）来逐步摸索大规模生产抗体的工艺条件。目前抗体生产的工艺主要是流加（Fed-Batch）和灌注（Perfusion）培养工艺；具体采用哪一种工艺，要依赖于企业的抗体产量需求和资源投入意愿。

      安泰吉的CHO-K1-GS稳定细胞系，可以高效地筛选出高表达的稳定性细胞株。此外，通过安泰吉的糖基改造细胞株以及人源化改造细胞株，能够为抗体进行不同改造的抗体。通过从细胞水平、蛋白表达水平和基因水平进行多水平的分析和考量，帮助客户挑选出最优的单克隆。通过与自主开发的培养基相结合，对于抗体类项目，产量一般可以达到1g/L以上。安泰吉在蛋白/抗体药物分子的设计和开发上积累了丰富的研发经验，提供高效、快速、稳定细胞系构建服务，可明显提高细胞的抗体表达量和产率，显著缩短细胞稳定株的开发时间，满足客户的需求。