稳定细胞株表达生产服务
抗体的稳定表达流程:
载体构建 | |
基因序列密码子优化; 表达抗体的理化性质和空间结构预测分析; 选择合适的信号肽、载体骨架; 使用分子生物学方法构建载体; 大量提取构建的载体,同时保证其纯度; | 1 ~ 3 周 |
细胞转染 | |
使用化学转染或者电转染; | 0.5 天 |
小量抗体表达评估 | |
细胞培养上清抗体表达分析:ELISA,Western Blotting,IHC,ICC,Flow Cyt,IP,SDS-PAGE等; 抗体纯化:使用亲和层析、离子交换层析、凝胶过滤层析、疏水层析、透析和超滤等方法; 抗体鉴定:SDS-PAGE、理化性质分析、病毒含量分析、HCP分析、质谱分析、效价分析、ADCC活性分析、特异性分析等; | 2 ~ 3 周 |
稳定细胞株筛选 | |
稳定转染; 压力筛选; (或根据需求是否需要以下操作:) • 细胞库进行亚克隆,筛选产量高的亚克隆; • 稳定性测试,不同批次培养,评价表达水平; • 储备RCB,细胞冻存; | 4~12周 |
大规模抗体表达和纯化 | |
细胞转染和悬浮培养; 抗体纯化:使用亲和层析、离子交换层析、凝胶过滤层析、疏水层析、透析和超滤等方法; 抗体鉴定:SDS-PAGE、理化性质分析、病毒含量分析、HCP分析、质谱分析、效价分析、特异性分析等; | 2 ~ 3 周 |
最终交付 | |
抗体及其QC数据及实验报告; | 1 ~ 3 天 |
我们的优势
1.一站式服务:从载体构建到抗体纯化,为您解决所有问题。
2.合格的细胞株:从ATCC购买的CHO-K1细胞株,保证表达抗体的质量。
3.节省时间:快速的载体构建策略、抗体表达分析技术、细胞培养和抗体纯化方法,为您节约时间成本。
4.高表达水平:通过在载体序列(具有极强分泌效果的信号肽、表达基因序列的密码子优化、分子量小的载体、可在染色体外复制的载体等)、转染方法和细胞培养等方面,显著提高抗体表达的产量。
5.高质量的抗体:使用亲和层析、离子交换层析、凝胶过滤层析、疏水层析、透析和超滤等方法,最大限度保证抗体的活性,病毒灭活,减少多聚体的形成。
6.高成功率:在我们的哺乳动物表达系统中已经成功表达80多个抗体。
7.大规模生产:通过悬浮培养,可获得高产量的抗体。
8.解决抗体表达量低的问题:通过优化基因序列密码子,以使抗体表达尽可能增加;选择合适的信号肽使抗体分泌到细胞外,以减少对细胞正常生理活动的影响;在不影响抗体功能的前提下,通过生物信息学的策略,对基因序列进行突变,以减少抗体的聚集,进而提高产量。
9.抗体改造:专业的抗体结构分析和改造,为您提供最合适的抗体。
根据不同的需求,安泰吉公司可为您定制化生产不同要求的的抗体,客户可以自由选择不同的细胞株和不同的表达方式,进而选择不同的表达规模(30ml~1L)及表达量。