在确定了生产用的‘抗体高产的单克隆CHO细胞稳定株’以后，需要尽快使其适用生产规模下的培养条件。

       抗体生产的关键技术指标主要包括：CHO细胞稳定株的抗体表达能力应该 >20p/c/d/（可通过CHO细胞稳定株的构建来实现）；大规模培养工艺的抗体生产水平应该 >2g/L；抗体的纯化收率应该大于70%（可通过抗体的大规模纯化工艺和质量控制来实现）。要实现大规模生产抗体 >2g/L的指标，就需要探索和优化CHO细胞稳定株的小试工艺条件，通过0.1-2L, 5-50L, 100-200L 和200-2000L的生物反应器（bioreactors）来逐步摸索大规模生产抗体的工艺条件。目前抗体生产的工艺主要是流加（Fed-Batch）和灌注（Perfusion）培养工艺；具体采用哪一种工艺，要依赖于企业的抗体产量需求和资源投入意愿。

      影响抗体生产质量的参数有很多种，主要包括：培养温度、pH、pCO2、NH4+、DO（溶氧），营养组分及含量、废物组分及含量、细胞培养液添加剂，细胞生长速率，抗体表达速率，细胞紧张和裂解（cell stress & lysis），抗体的氧化、脱氨、异构化、蛋白酶水解、糖化、糖基化改变，HMW，LMW等。在工艺探索和优化过程中，需要仔细研究这些参数的变化，同时采取对策优化，以保证后续的大规模生产时的抗体产品质量。细胞培养工艺放大的基本原则是：非体积依赖参数要保持不变（如温度、溶氧、pH等），体积依赖参数（工作体积、流加体积、通气量等）要实现线性放大，同时还要考虑溶氧供应和CO2的去除等因素是否能满足培养工艺的要求。

     CHO细胞CDM培养液是影响抗体产量的重要因素之一。不同种类的CHO细胞对营养的需求差别很大，即使是基于同一种CHO细胞所构建的不同克隆，其代谢特点和营养需求也不尽相同。因此，在CDM培养液的开发过程中需要特别强调“个性化培养液”的理念，也就是根据生产用的CHO细胞系的代谢特点来优化和定制CDM培养液。开发CDM培养液的主要方法包括：培养液混合法（Medium Mixing/Blending）、组分滴定法和消耗组分分析法。

      完成CHO细胞稳定株的工艺放大和优化后，需要构建主细胞库（Master Cell Bank, MCB）和工作细胞库（Working Cell Bank, WCB），最后开始工艺技术向抗体大规模生产设施的转移，进入产业化（CMC）阶段。在细胞培养工艺的放大优化和技术转移过程中，首要考虑的是保证培养工艺变更前后的细胞活性、抗体收率和抗体产品质量等主要技术指标的稳定。

       在产业化阶段，需要对细胞培养工艺做充分的定性研究，对诸多工艺参数（接种量、培养温度、pH、DO等）做风险排序，确定关键工艺参数和操作范围。另外，细胞培养工艺还需要满足抗体药物的上市评审要求，用生产规模的实验数据来支撑申报材料，即所谓的“工艺验证”。美国FDA和欧洲EMEA分别要求连续3或5批连续的生产规模试验数据，并以此为“生物制品许可申请”（BLA）文件的重要内容，而中国CFDA也有雷同的要求，通常是连续3个批次的200升连续生产的试验数据。